蛋白質(zhì)免疫印跡法 (Western Blot ) ，簡(jiǎn)稱WB ，是指通過SDS-PAGE膠將不同分子量的蛋白質(zhì)分離開，然后將目標(biāo)蛋白轉(zhuǎn)移到載體(PVDF)膜上，利用抗原抗體的特異性結(jié)合，用特異性的一抗結(jié)合目標(biāo)蛋白，用HRP標(biāo)記的二抗結(jié)合一抗，再加以ECL發(fā)光液顯色，檢測(cè)組織或者細(xì)胞內(nèi)某種或者某些特異性蛋白質(zhì)的表達(dá)。蛋白質(zhì)免疫印跡是做蛋白質(zhì)分析的一種常規(guī)技術(shù)，常用于鑒定某種蛋白，并能對(duì)蛋白進(jìn)行定性和半定量分析，還可以用于蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)、蛋白質(zhì)-DNA、蛋白質(zhì)-RNA相互作用后續(xù)分析。

實(shí)驗(yàn)原理

免疫印跡法原理：將蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到膜上，然后利用抗體進(jìn)行檢測(cè)。對(duì)已知表達(dá)蛋白，可用相應(yīng)抗體作為一抗進(jìn)行檢測(cè)，對(duì)新基因的表達(dá)產(chǎn)物，可通過融合部分的抗體檢測(cè)。免疫印跡法是一種將高分辨率凝膠電泳和免疫化學(xué)分析技術(shù)相結(jié)合的雜交技術(shù)，免疫印跡法具有分析容量大、敏感度高、特異性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)，是檢測(cè)蛋白質(zhì)特性、表達(dá)與分布的一種最常用的方法，如組織抗原的定性定量檢測(cè)、多肽分子的質(zhì)量測(cè)定及病毒的抗體或抗原檢測(cè)等。

我們的優(yōu)勢(shì)

1. 技術(shù)人員操作經(jīng)驗(yàn)豐富，實(shí)驗(yàn)結(jié)果有保障

2. 細(xì)胞庫豐富，擁有人、小鼠、大鼠、兔、猴等不同種屬的細(xì)胞裂解液

3. 公司強(qiáng)大的產(chǎn)品庫，有高靈敏度、高特異性的WB應(yīng)用的抗體平臺(tái)

實(shí)驗(yàn)流程

實(shí)驗(yàn)周期：1-2周

圖片展示

服務(wù)流程

注意事項(xiàng)

1. 新鮮組織，組織＞30mg干冰運(yùn)輸。

2. 細(xì)胞量為5*10^6以上，收集細(xì)胞沉淀，干冰運(yùn)輸。

3. 樣品蛋白濃度＞1mg/ml，蛋白量＞200ug/樣品，細(xì)菌濕重＞1mg等。

4. 建議提供目的蛋白陽性表達(dá)樣品（純蛋白、有陽性表達(dá)的細(xì)胞或組織、商品化的陽性對(duì)照產(chǎn)品等）作為陽性對(duì)照。

5. 目的蛋白相應(yīng)一抗：請(qǐng)您提供質(zhì)量保證的一抗（或委托我公司準(zhǔn)備）?？贵w的使用量通過預(yù)實(shí)驗(yàn)后進(jìn)行確認(rèn)，原則上不回收使用一抗。

6. 陽性對(duì)照樣品（盡量提供）。

7. 相關(guān)文獻(xiàn)（可選）。

注：若有特殊處理的樣品，請(qǐng)盡可能出示相關(guān)材料（具有保密性的材料除外）若要檢測(cè)磷酸化蛋白，請(qǐng)?jiān)?-3個(gè)月內(nèi)進(jìn)行，因?yàn)殚L(zhǎng)時(shí)間保存的樣品容易使磷酸化蛋白去磷酸化而檢測(cè)不到磷酸化條帶。